利用斑馬魚模型評價抗氧化功效
【評價原理】
甲萘醌是一種氧化劑,通過細胞內還原酶系統(微粒體的P450還原酶和線粒體的呼吸鏈還原酶),產生不穩定的半醌,進入氧化還原循環,產生活性氧族。用甲萘醌可誘導斑馬魚建立氧化應激模型。
經過特異性熒光染色(呈綠色,主要定位于細胞核和線粒體),發生氧化應激反應斑馬魚全身明顯比正常斑馬魚綠很多,可以用熒光顯微鏡下觀察到斑馬魚體內的活性氧含量。
【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和抗氧化劑組。其中正常對照組未攝入甲萘醌,模型對照組與抗氧化劑組都攝入了等量的甲萘醌(甲萘醌通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)??寡趸瘎┙M在攝入甲萘醌之后攝入還原型谷胱甘肽之類的抗氧化劑。
服用一定時間抗氧化劑后,我們對斑馬魚整體做活性氧染色,觀察整體綠色熒光強度的變化。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚活性氧表型圖。(綠色熒光為活性氧)
可以看到,抗氧化劑組的熒光強度較正常對照組強,但較模型對照組明顯減弱。
【評價結論】
1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗,抗氧化劑組的熒光強度比模型對照組弱。
2.本實驗證實了還原型谷胱甘肽具有明顯抗氧化功效。